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光褪色後蛍光回復法 – FRAP

FRAP(光褪色後蛍光回復法)は分子の動態を見る手法で、細胞の中のある一部分にレーザーを集光し、その部分を褪色させた後、その部分の蛍光の回復を観察する。褪色した周りの分子が動かなければ、褪色した部分はそのまま。それに対し more

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FLIMシステムの構成例を図1に示す。ここでは時間領域測定法を用いてFLIMシステムが構築されている。

FLIMの最大の特徴は時間を基準として定量化できることである。

蛍光物質に光を照射すると、発生した蛍光は直ちには減衰せず、その蛍光物質特有の減衰時間 (蛍光寿命) をもって減衰する。

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FRETの起こりやすさはいくつかの因子に依存し、次式のFörsterの計算式からFRETの起こりやすさを見ることができる。

蛍光共鳴エネルギー移動 (FRET) とは、近接した2個の蛍光分子の間で励起エネルギーが、電子の共鳴により直接移動する現象である。

蛍光顕微鏡によるイメージングの例を以下に示す。

蛍光顕微鏡を利用することにより、次のようなことが可能となる。